植物外泌体检测-武汉贝科新肽科技公司(图)

外泌体（Exosome）是一类由细胞分泌的纳米级脂质双层膜囊泡，直径约30~150 nm，广泛存在于血液、尿液、牛奶等各类体液中，几乎所有细胞类型均可分泌外泌体。作为细胞间通讯的“纳米信使”，外泌体携带母体细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、miRNA、lncRNA等）、脂质等生物活性物质，能够反映细胞的生理与病理状态，在疾病发展、细胞信号传导、免疫调节等过程中发挥关键作用，同时也为疾病诊断、监测及递送提供了全新的研究方向与技术靶点。自1987年Johnstone正式命名“Exosome”以来，外泌体的研究热度持续攀升，而外泌体检测技术的突破的是推动其从基础研究走向临床应用的支撑，本文将系统梳理外泌体检测的技术、研究进展、临床应用及现存挑战与展望。

冷冻透射电镜（cryo-TEM）无需化学固定与染色，将样品快速浸入液态玻璃化冷冻，在液氮温度下成像；能保留外泌体天然结构（膜、内部成分），适合高分辨率三维重构（冷冻电子断层扫描 cryo-ET）；缺点是设备昂贵、样品制备门槛高。

超薄切片 TEM外泌体经 / 双固定、脱水、树脂包埋后，植物外泌体检测，切成 40–90 nm 超薄切片，染色后观察；适合观察细胞内多囊体释放外泌体的原位结构，或外泌体群体的内部细节。

扫描电镜（SEM）电子束扫描样品表面成像，主要看外泌体在基底上的分布与表面形貌；需喷金导电处理，分辨率略低于 TEM，不适合观察内部膜结构。

外泌体的典型形态为球形或类球形，部分情况下可呈现出盘状、杯状或不规则形态，这与样本制备过程（如干燥、染色）及外泌体的自身状态密切相关——例如，电镜下常见的“茶杯状”外泌体，实际上是干燥过程中囊泡瘪塌形成的假象，而非其天然形态，但这种形态已成为外泌体形态学鉴定的公认特征之一。外泌体的结构是脂质双层膜，其膜成分与细胞膜相似，主要包括磷脂、胆固醇、鞘脂等，同时膜表面还富含多种蛋白质，如四跨膜蛋白（CD9、CD63、CD81）、整合素、黏附分子等，这些蛋白质不仅参与外泌体的形成和释放，还能介导外泌体与的识别和结合，是外泌体亚型鉴定的重要标志物。



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