外泌体检测服务-武汉贝科新肽(图)

标志性分子检测是外泌体鉴定的，ISEV推荐检测的阳性标志物包括跨膜蛋白CD63、CD9、CD81，溶质蛋白TSG101、Alix等，同时需检测Calnexin等阴性标志物，排除杂质干扰。常用检测方法包括Western Blot（WB）与流式细胞术：WB通过电泳分离、转膜、孵育等步骤，检测特定蛋白条带，可验证标志物的存在，但操作繁琐、灵敏度较低；流式细胞术借助荧光标记与外泌体表面抗原结合，可快速、定量检测表面标志物表达，确定外泌体纯度与数量，但对样本纯度要求较高，易出现假阳性结果。

冷冻 TEM（近天然结构）

原理：样品快速浸入液态玻璃化，全程无化学固定 / 脱水 / 染色，在液氮低温下成像，可观察真实双层膜、内容物，适合高分辨率结构研究。

流程：3 μL 样品滴多孔碳网 → 滤纸轻吸成薄水膜 → 液态冷冻 → 液氮转移至电镜冷台（-170℃以下）成像；冷冻断层扫描（cryo-ET）可重构 3D 结构。

优点：结构保真度极高；缺点：设备昂贵、操作复杂。

超薄切片 TEM

用于细胞内 / 组织中外泌体定位，或观察群体分布；流程： + 双固定 → 梯度脱水 → 环氧树脂包埋 → 切片机切成 40–90 nm 薄片 → 醋酸铀 + 柠檬酸铅染色 → TEM 观察。

此外，动态光散射（DLS）适用于均一样品的快速初步粒径评估，操作简便，但对大颗粒敏感、重复性有限；纳米库尔特技术可提供外泌体的颗粒浓度，但受检测范围限制；分析型离心（AUC）在评估样本纯度方面具有优势，外泌体检测服务，可通过沉降行为与紫外吸收区分外泌体与杂质，但通量较低。研究表明，单一技术不足以表征外泌体，整合多种技术进行正交验证，才能建立的外泌体表征体系。



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