依托改造后的根癌农杆菌Ti质粒T-DNA转移系统，去除质粒致瘤基因，构建安全的二元载体、三元载体系统。将目的基因与筛选标记基因插入T-DNA区域，在农杆菌Vir毒蛋白的诱导作用下，T-DNA切割、转移并整合至水稻细胞核基因组，实现外源基因的稳定插入与表达。常用农杆菌菌株为EHA105、AGL-1，适配水稻愈伤组织侵染体系。
适用受体材料受体为水稻成熟种子诱导的胚性愈伤组织，材料获取不受季节、生育期限制，可全年开展转化实验；其次可选用水稻幼胚、幼穗诱导愈伤，再生能力更强，但取材受限。粳稻愈伤诱导与再生效率显著优于籼稻，籼稻是目前水稻转化的主要难点材料。
玉米基因转化原理玉米基因转化的逻辑是外源基因递送—基因组整合——稳定遗传表达。利用生物介导或物理化学手段，将携带目的基因的外源DNA片段导入玉米受体细胞，通过DNA同源重组或随机整合机制，使外源基因稳定嵌入玉米核基因组；再通过植物组织培养技术，将转化后的单细胞、愈伤组织或幼胚再生为完整植株，终筛选获得可稳定遗传外源性状的玉米株系。与模式植物拟南芥不同，玉米属于单子叶禾本科作物，自然状态下难以被农杆菌侵染，且愈伤组织分化、再生难度高、基因型依赖性强，因此需要针对性优化转化载体、侵染体系与组培方案，才能实现转化。
水稻组培是水稻基因转化的瓶颈与关键支撑技术，玉米组培，所有农杆菌介导的水稻阳性植株获得，完全依赖标准化、高稳定性的水稻组织培养体系。水稻组培是以成熟种子为起始材料，诱导胚性愈伤，再经过侵染筛选、分化、生根获得完整再生植株。相较于玉米，水稻组培体系更稳定、周期更短，但存在粳稻易成、籼稻难愈、褐化高发、假阳性频发等典型问题。本文聚焦实验水稻组培全流程，明确标准参数、关键要点与禁忌事项。
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