






植物外泌体(植物源外泌体样纳米颗粒,PELNs)检测以形态、粒径、浓度、生化组成、纯度为,优先用TEM+NTA+WB / 质谱组合鉴定,再做功能与质控检测。
一、鉴定三要素(ISEV 标准)
1. 形态学观察(TEM/SEM/AFM)
透射电镜(TEM):金标准,可见双层膜、杯状 / 茶托状、近球形结构,粒径 30–150 nm。
扫描电镜(SEM):看表面形貌与分散性。
原子力显微镜(AFM):测三维形貌与膜厚度。
2. 粒径与浓度(NTA/DLS)
纳米颗粒跟踪分析(NTA):单颗粒,给出粒径分布(30–150 nm 为主)、浓度、多分散性,适合复杂样本。
动态光散射(DLS):测平均粒径与 PDI,适合单分散体系,不能替代 NTA。
合格参考:主峰 30–150 nm,浓度≥1×10? particles/mL。
新兴检测技术中,表面增强拉曼光谱(SERS)技术凭借超灵敏、高特异性、可多元检测的优势,成为外泌体检测的研究热点,可实现外泌体浓度、表面表型、膜内物质的检测,在临床医学诊断中展现出良好的应用前景,截至2024年10月,外泌体免疫电镜,近十年相关研究已累计发表213篇,引用量达4051次,体现了该技术的快速发展与巨大潜力。此外,CRISPR-Cas12a耦合微流控平台可实现10种miRNA并行分析,检测限低至10?1? mol/L;“适体-纳米孔”技术可同步捕获外泌体PD-L1蛋白与let-7a miRNA,揭示免疫逃逸机制;纳米材料传感器(如石墨烯场效应管)具有信号放大效应强、检测范围宽等优势,检测范围可达103~1012 particles/mL。

外泌体的尺寸微小(30~150 nm),传统光学显微镜无法清晰呈现其形态和结构,而电子显微镜技术通过电子束替代可见光,利用电子的波动性和粒子性,实现了纳米级的分辨率,能够直观、清晰地展示外泌体的超微结构,是外泌体形态学鉴定和结构分析的工具。目前,用于外泌体研究的电镜技术主要包括透射电镜、扫描电镜、冷冻透射电镜、电子断层扫描及免疫电镜等,各类技术的原理、特点及应用场景存在显著差异,下面分别进行详细阐述。
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