






标准检测流程(推荐)
样本前处理:收集质外体液 / 汁液,过滤(0.45/0.22 μm),去多糖 / 多酚 / 果胶。
分离纯化:差速离心→密度梯度离心 / 尺寸排阻 / 超滤→浓缩。
鉴定:
TEM:形态 + 粒径
NTA:粒径分布 + 浓度
WB / 质谱:标志蛋白
核酸 / 脂质分析
纯度验证:粒子 / 蛋白比、破膜实验、污染标志物检测。
功能验证:细胞摄取、活性、 / 抗病等。
五、质控与合规(如 FDA DMF)
纯度、粒径 / 浓度、形态、蛋白 / 核酸 / 脂质组成、稳定性、生物活性、安全性(细胞毒性)、抗原性。
植物外泌体检测难点
植物样本含大量多糖、多酚、果胶、细胞壁碎片,易共沉淀,干扰检测。
缺乏广谱、高特异性植物外泌体,标志物鉴定受限。
提取量极低(1 kg 样本≈μg 级),需高灵敏度方法。
此外,动态光散射(DLS)适用于均一样品的快速初步粒径评估,操作简便,但对大颗粒敏感、重复性有限;纳米库尔特技术可提供外泌体的颗粒浓度,但受检测范围限制;分析型离心(AUC)在评估样本纯度方面具有优势,可通过沉降行为与紫外吸收区分外泌体与杂质,但通量较低。研究表明,单一技术不足以表征外泌体,整合多种技术进行正交验证,才能建立的外泌体表征体系。

粒径与浓度分析的主流技术为纳米颗粒分析(NTA),其基于光散射原理,通过高速摄像机记录外泌体的布朗运动轨迹,外泌体检测服务,结合斯托克斯-爱因斯坦方程,可快速获得外泌体的粒径分布与浓度信息,检测过程无需复杂样本处理,能在近乎原始状态下检测外泌体,但对浓度过高或过低的样本准确性受影响,且无法区分外泌体与其他相似粒径的杂质颗粒。
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