标准检测流程（推荐）
样本前处理：收集质外体液 / 汁液，过滤（0.45/0.22 μm），去多糖 / 多酚 / 果胶。
分离纯化：差速离心→密度梯度离心 / 尺寸排阻 / 超滤→浓缩。
鉴定：
TEM：形态 + 粒径
NTA：粒径分布 + 浓度
WB / 质谱：标志蛋白
核酸 / 脂质分析
纯度验证：粒子 / 蛋白比、破膜实验、污染标志物检测。
功能验证：细胞摄取、活性、 / 抗病等。
五、质控与合规（如 FDA DMF）
纯度、粒径 / 浓度、形态、蛋白 / 核酸 / 脂质组成、稳定性、生物活性、安全性（细胞毒性）、抗原性。
植物外泌体检测难点
植物样本含大量多糖、多酚、果胶、细胞壁碎片，易共沉淀，干扰检测。
缺乏广谱、高特异性植物外泌体，标志物鉴定受限。
提取量极低（1 kg 样本≈μg 级），需高灵敏度方法。
冷冻 TEM（近天然结构）
原理：样品快速浸入液态玻璃化，全程无化学固定 / 脱水 / 染色，在液氮低温下成像，可观察真实双层膜、内容物，适合高分辨率结构研究。
流程：3 μL 样品滴多孔碳网 → 滤纸轻吸成薄水膜 → 液态冷冻 → 液氮转移至电镜冷台（-170℃以下）成像；冷冻断层扫描（cryo-ET）可重构 3D 结构。
优点：结构保真度极高；缺点：设备昂贵、操作复杂。
超薄切片 TEM
用于细胞内 / 组织中外泌体定位，或观察群体分布；流程： + 双固定 → 梯度脱水 → 环氧树脂包埋 → 切片机切成 40–90 nm 薄片 → 醋酸铀 + 柠檬酸铅染色 → TEM 观察。
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