外泌体检测技术-贝科新肽科技公司

1983年，外泌体在绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其正式命名为“exosome”，自此开启了外泌体研究的序幕。外泌体是细胞外囊泡（Extracellular Vesicles， EVs）的重要亚型，特指直径在30~150 nm之间（多数研究认为40~100 nm）、由细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体与细胞膜融合后释放到胞外基质中的盘状或球形小泡，其表面具有脂质双层膜结构，内部包裹着DNA、RNA、蛋白质、脂质、代谢物等多种生物活性分子。作为细胞间通讯的“信使”，外泌体能够将携带的生物活性 cargo 转运至，调控的生物学功能，参与机体免疫调节、组织修复和发展、神经退行性疾病进展等一系列生理病理过程，同时因其广泛存在于血液、唾液、尿液、脑脊液、等体液中，且具有来源广泛、稳定性强、特异性高的特点，被认为是极具潜力的疾病诊断生物标志物和递送载体。


外泌体的形成与分泌遵循特定的生物学路径，源于细胞内多囊泡体与细胞膜的融合，其的脂质双层膜结构能够保护内部生物分子免受体液中核酸酶、蛋白酶的降解，确保其在复杂体液环境中保持稳定。外泌体的特性体现在两个方面：一是来源的广泛性，无论是正常细胞还是病变细胞（如细胞），均能分泌外泌体，外泌体检测技术，且不同细胞来源的外泌体携带具有特异性的生物标志物；二是功能的多样性，外泌体可通过两种方式发挥生物学效应，要么通过直接融合或内吞作用将内容物送入，调控生物学行为，要么通过表面配体与受体的特异性结合信号通路，参与细胞增殖、分化、免疫逃逸等多种生理与病理过程，尤其在转移、血管生成、耐药等机制中发挥重要作用。


与扫描电镜不同，TEM需要将样品制备成超薄切片（厚度通常为50~100 nm）或直接将纳米级样品吸附在载样网上，确保电子束能够穿透样品。对于外泌体样品，通常采用负染法或正染法进行染色处理，以增强样品与背景的对比度，便于观察外泌体的形态和结构——负染法是利用高电子密度的重金属盐（如磷钨酸、醋酸铀）包裹外泌体表面，使背景呈现深色，外泌体呈现亮白色的“亮核暗晕”形态；正染法则是让重金属盐渗透到外泌体内部，使外泌体呈现深色的“暗核亮背景”形态，两种染色方法各有优势，可根据研究需求选择使用。


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