






外泌体电镜的标准操作流程:
样品制备(超离后/色谱后样本的稀释、上样技巧)。
负染步骤详解(醋酸双氧铀 vs. 磷钨酸的选择、浓度、时间、注意事项)。
制样常见陷阱(如何避免“盐结晶”、样品聚集、染色沉淀)。
关键图谱解读与陷阱分析:
外泌体的典型形态(“杯状结构”的成因与争议)。
如何区分外泌体、微囊泡、脂蛋白、蛋白聚合物。
常见假象(箭头指向关键特征,外泌体检测服务,解释其成因)。
标准检测流程(推荐)
样本前处理:收集质外体液 / 汁液,过滤(0.45/0.22 μm),去多糖 / 多酚 / 果胶。
分离纯化:差速离心→密度梯度离心 / 尺寸排阻 / 超滤→浓缩。
鉴定:
TEM:形态 + 粒径
NTA:粒径分布 + 浓度
WB / 质谱:标志蛋白
核酸 / 脂质分析
纯度验证:粒子 / 蛋白比、破膜实验、污染标志物检测。
功能验证:细胞摄取、活性、 / 抗病等。
五、质控与合规(如 FDA DMF)
纯度、粒径 / 浓度、形态、蛋白 / 核酸 / 脂质组成、稳定性、生物活性、安全性(细胞毒性)、抗原性。
植物外泌体检测难点
植物样本含大量多糖、多酚、果胶、细胞壁碎片,易共沉淀,干扰检测。
缺乏广谱、高特异性植物外泌体,标志物鉴定受限。
提取量极低(1 kg 样本≈μg 级),需高灵敏度方法。
应用场景
外泌体的形态学鉴定(区分外泌体与微囊泡、凋亡小体);
疾病标志物研究(如来源外泌体的形态变化);
外泌体载药 / 工程化后的结构表征;
外泌体与细胞 / 材料相互作用的超微观察。
一、一句话区别
TEM(透射电镜):看内部、看膜结构、看典型外泌体形貌 → 外泌体鉴定金标准
SEM(扫描电镜:看表面、看立体形貌、看分布 → 辅助观察,不做主鉴定
二、关键区别(外泌体版)
1. 看什么不一样
TEM(透射)
电子穿透样品
看到:膜结构、双层膜、杯状 / 茶托状、大小均一性
能直接判断:这是不是外泌体
典型图:一个个圆盘 / 杯状小囊泡
SEM(扫描)
电子只扫表面
看到:3D 立体表面、颗粒圆润度、分布密度
看不到内部膜结构
典型图:一堆小圆球堆在一起
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