实验室内在不使用通风柜时也要时常通风，这样对试验人员的身体健康有益 ;通风柜在使用时，每2小时进行10分钟的补风(即开窗通风)使用时间超过5小时的，要敞开窗户，避免室内出现负压 ;禁止在未开启通风柜时在其通风柜内做实验 ;禁止在做实验时将头伸进通风柜内操作或查看 ;禁止通风柜内存放或实验危险物品 ;禁止将移动插线排或电线放在通风柜内 。
通风柜使用前应检查电源，给排水、气体等各种开关及管路是否正常;打开照明设备，检查视光源及柜体内部是否正常 ;打开抽风机，约3分钟内，静听运转是否正常 ;通风柜依以上顺序检查时，如有问题，请即暂停使用，并通知保养单位处理 ;通风柜关机前，抽风机应继续运转几分钟，使柜内废气完全排除 ;通风柜使用后应将柜体内外擦拭清洁，并关闭各项开关及视窗 。
通风柜没有确定的使用年限。就目前生产厂家的通风柜不仅在排风原理上有了很大的突破，同时整个通风柜的材质也经过特殊处理，一定程度上延厂了通风柜的使用寿命。通风柜在使用过程中经常都会接触各种有害气体和物质，即使材料能够防止腐蚀，但是如果我们日常不注意保养清洁的话，标准型通风柜，还是会降低实验室通风柜的使用年限。当我们在使用通风柜时，切记不要突然关闭通风柜，尤其是在进行一些实验之后，这样很有可能会导致一些有害气体无法排除，滞留在通风柜内给柜体造成腐蚀等影响;另外通风柜外表也要定期的进行打扫和清理，并定期的对通风柜及其管道、零部件等进行维护保养检修。
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